實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。
小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全，須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中，應(yīng)避免引起氣溶膠類物質(zhì)的產(chǎn)生，小心毒性藥品，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭之傷害等。接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出，以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%的酒精擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。使用無菌瓶內(nèi)的溶液是，不可將無菌敷料堵塞瓶口傾倒無菌溶液，或直接伸入溶液瓶內(nèi)蘸取，以免污染剩余的溶液。每次操作過程中，均應(yīng)做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。如有菌液灑在桌上或地上，應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應(yīng)立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。
無菌包內(nèi)物品不慎污染或無菌包浸濕，外界微生物可滲入包內(nèi)，造成污染，需重新消毒。凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒，24小時后取出沖洗。
戴手套時應(yīng)注意未戴手套的手不可觸及手套外面，而戴手套的手則不可觸及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如發(fā)現(xiàn)破裂，應(yīng)立即更換。脫手套時，須將手套口翻轉(zhuǎn)膠下，不可用力強(qiáng)拉手套邊緣或手指部分，以免損壞。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以70%的酒精擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘以上后。
總的來說，實(shí)驗(yàn)室裝修不是普通的工裝裝修，有自己特定的標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范，無菌室設(shè)計(jì)裝修有很多細(xì)節(jié)需要注意，在裝修中必須綜合考慮實(shí)驗(yàn)室整體規(guī)劃合理布局。當(dāng)前無菌室多存在于微生物工廠，一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺。超凈臺其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過電動裝置使空氣通過過濾器具后進(jìn)入工作臺面，使臺面始終保持在流動無菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。隨著實(shí)驗(yàn)室裝修水平的提高，實(shí)驗(yàn)室工作人員對設(shè)計(jì)的要求越來越高，